所谓磁珠大家了解多少呢
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磁珠是高通量测序过程中的必备产品之一,但实践应用中咱们发现并不是所有人都了解磁珠作业的原理,咱们以建库过程中为常见的纯化磁珠为例,为大家介绍DNA纯化磁珠的作业原理。什么是磁珠?磁珠是一种粒径为纳米或微米巨细、具有超顺磁性的颗粒。
所谓超顺磁性简单说便是在有外磁场时会呈现出弱磁性,撤去磁场后没有剩磁。磁珠一般由基质、磁性物质(四氧化三铁)、有官能团润饰的高分子材料组成。不同功用磁珠,其基质和表面润饰官能团不同。常用的基质有聚苯乙烯,具有很好的均一性和分散性,因而可操作性强。
可以让磁珠像液体相同被处理,同时与方针分子接触面积大,因而DNA吸赞同洗脱效率高。磁珠外表润饰有不同的官能团,高通量测序中常见润饰官能团有羟基、羧基、Oligo(dT)及链霉亲和素等,以适用于不同的类型的文库构建或生物学应用,而DNA纯化磁珠其表面润饰官能团便是羧基。
磁珠作业的原理是什么?磁珠纯化核酸的原理一般是固相可逆固定技能在必定条件下核酸被选择性地固定在磁珠上,而污染物则留在溶液中,外加磁场后将吸附了方针分子的磁珠与溶液别离,然后清洗磁珠进一步去除污染物,之后在必定条件下将核酸从磁珠上洗脱下来,不同官能团润饰的磁珠,结合与洗脱方式不同。